固相萃取柱的清潔是保障實驗精度、延長耗材壽命的關鍵環節。以下從預處理、深度清潔、特殊材質處理及存儲維護四方面系統闡述專業清潔流程:
一、基礎清潔流程
1. 正向沖洗法
- 溶劑選擇邏輯:遵循“高→中→低”極性梯度原則。強洗脫劑(甲醇/乙腈)破除頑固殘留,繼而切換至中等極性溶劑(二氯甲烷/乙酸乙酯)清除中間產物,終以純水驅離水溶性雜質。每種溶劑用量建議達到柱體積的5~10倍以確保充分浸潤。
- 流速控制要點:采用低壓慢速模式(≤2mL/min),避免劇烈沖刷導致填料密實度改變。可借助恒流泵實現精準控速,觀察流出液由渾濁轉澄清即為達標信號。
2. 反向沖擊策略:針對已出現明顯堵塞的色譜柱,將其倒置連接至固相萃取裝置,利用高壓氮氣瓶提供脈沖式氣流(0.4MPa)。該力學作用可有效剝離附著于篩板表面的膠狀沉積物,隨后立即執行正向沖洗以避免二次沉降。
二、靶向污染物處置方案
1. 生物樣本殘留:蛋白質變性沉淀可采用pH=7.4的磷酸鹽緩沖液+0.1%Tween-20的組合拳,前者維持等電點防止蛋白構象劇變,后者通過降低表面張力瓦解黏附層。必要時引入蛋白酶K消化過夜。
2. 脂質混合物侵襲:啟用丙酮-正己烷(1:1)協同體系,前者溶解磷脂雙分子層,后者破壞膽固醇結晶域。60℃水浴條件下循環沖洗效果更佳。
三、特種填料再生技術
1. 離子交換柱復活術:陽離子型樹脂遭遇金屬螯合物污染時,依次注入3mol/L HCl溶液(釋放結合態Ca²?/Mg²?)、去離子水直至中性,最后用含0.1mol/LEDTA的Tris緩沖液(pH=8.0)復蘇功能基團。陰離子柱則需改用NaOH替代HCl進行類似操作。
2. 石墨烯復合介質養護:此類新型吸附劑嚴禁超聲震蕩!推薦使用乙醇-水(7:3)低功率連續沖洗,輔以磁力攪拌子低速攪動(<200rpm)。自然風干后真空封存以防氧化降解。
四、效能驗證與品質管控
1. 標準曲線核查:配制系列濃度的標準品溶液(涵蓋線性范圍下限至上限),經潔凈柱體處理后測定回收率。若目標物回收率落在85%~115%區間且RSD<5%,表明清潔程序可靠。
2. 空白對照實驗:隨機抽取洗凈后的空柱進行全流程模擬操作,GC-MS/HPLC檢測不應檢出前次使用的標志性化合物。特別關注難揮發物的殘留痕跡。